【AD】侧脑室注射STZ诱导AD模型

1  实验器材

干棉球、酒精棉球、75%酒精、生理盐水、注射器（1ml）、黑色记号笔、大鼠脑立体定位仪、微量注射器。手术器械：颅钻、弯镊1对、组织剪、缝合线、缝合针。

 

2  实验试剂

STZ溶于柠檬酸缓冲液中（PH4.4）（3mg/kg）；麻醉剂：2%戊巴比妥钠（50mg/kg）；生理盐水。

 

3  造模步骤

3.1 SD大鼠称重，腹腔注射2%戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉。将大鼠头部固定于脑立体定位仪上。

3.2 剪去局部毛发，消毒后沿矢状线切开皮肤，切口长约1.5cm,将骨膜向两侧推开显露头骨。

3.3 按照大鼠脑立体定位图谱，以前囟为零起点，在前囟后1.5 mm、矢状缝侧方1.5mm处钻孔，采用微量注射器自脑表面垂直进针3.5mm，将STZ缓慢注入，每侧注入时间约5min,留针5 min，缓慢退针，无菌骨蜡封闭钻孔，术区滴注庆大霉素，缝合伤口消毒。在手术的第一天和第三天分别向两侧侧脑室内注射，每次注入约10ul(3mg/kg)。

3.4术后大鼠给予正常饲养外，牛奶灌胃4天。青霉素涂术口以防止感染。

 

 

4  模型评判标准

行为学检测：进行Morris水迷宫试验，试验分为定位航行实验和空间探索实验。

4.1 定位航行实验：大鼠连续接受5天的训练，每天4次，每次时间间隔30min，分别记录下大鼠从4个入水点入水后找到平台所需要的时间，即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果进入到最后统计。

4.2 空间探索实验：实验的第6天，撤去平台，从距离平台的

最远端入水后，将大鼠放入水中，记录下30s内大鼠的游泳轨迹，并观察分析大鼠穿越原平台所在位置的次数。

 

5  操作注意事项

5.1水迷宫测试，每天在固定的时间测试，操作轻柔，避免不必要的应激刺激。