【MCAO】大鼠四血管闭塞法建立MCAO模型评价方案

动物模型评价方案

一、动物模型命名

大鼠四血管闭塞法制备脑卒中（MCAO）模型

二、模型制备规范（环境、设备、操作程序、实验操作规程）

1、电凝双侧椎动脉，夹闭双侧颈总动脉缺血20分钟后恢复血流再灌注。

2、SD大鼠称重，2%戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉。将大鼠头部固定于立体定位仪，背侧颈部行正中切口，分离颈旁肌肉暴露第一颈椎横突，灼热电路铁针分别插入双侧的翼状孔，电凝双侧椎动脉，缝合肌肉及皮肤。再取下大鼠放置仰卧位，行颈部正中切口，分离双侧颈总动脉并埋线（4-0丝线）后缝合切口。术后将大鼠放于恒温箱温恢复24小时。次日2%戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉，仰卧位打开颈部切口，用动脉夹（3.7 cm）夹闭双侧颈总动脉实施全脑缺血，在夹闭20 min后去除双侧动脉夹恢复血流。缝合伤口，将实验动物放入舒适的笼内休息。

三、模型评价方法与指标体系（该模型制备采用的生理、生化和病理方法，包括行为、影像、生理生化和组织切片等技术设备，仪器设备满足模型评价的要求，指标完善，条件稳定。）

行为学评分：大鼠苏醒后，参照Zea Longa 5分制评分标准：0分代表无神经缺损症状；1分代表不能完全伸展对侧前肢；2分代表行走时向偏瘫侧转圈；3分代表行走时向偏瘫侧倾倒；4分代表不能自发行走、意识障碍；5分代表死亡。累积1分及以上即为造模成功；但凡达到5分、解剖发现蛛网膜下腔出血或无神经功能缺损症状（0分）均视为造模失败。

四、模型的安全性评价（监督管理、处置措施、微生物菌株管理、细胞系描述、遗传分析、对环境和生态影响评估等。）

该造模方法未使用化学试剂、药品等，不会对人员、动物、环境造成危害。

五、有助于动物模型鉴定和评价的其它材料（如影响模型制备、实验操作的注意事项，以及对造模的成功率、成活时间、死亡率的影响等。）

1、分离颈部肌肉时，两侧小块肌肉叫鼓泡腺体（很多人误认为是甲状腺），避免损伤导致出血。

2、见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经，若损伤则可能影响其呼吸而死亡的。